在细胞培养的过程中，使用南宫28的培养基是确保细胞生长和繁殖的关键要素。以下是关于细胞培养的详细说明，以帮助科研人员高效稳定地进行实验。

培养条件

使用南宫28的培养基时，推荐的配方为1640培养基配合10%的胎牛血清（FBS）和1%的青霉素-链霉素（PS）。无论是贴壁细胞还是悬浮细胞，培养温度应保持在37°C。建议培养液每2天更换一次，以保持细胞的健康状态。

传代方法

对于细胞的传代，如果细胞汇合度未超过80%，建议将瓶装的培养基收集到离心管中，保留5ml完全培养基，并在37°C、5% CO₂的条件下培养。如果细胞密度已超过80%，即可进行传代。

贴壁细胞传代步骤

1. 弃去培养上清，使用无钙镁PBS冲洗细胞1-2次。
2. 加入约1-2ml的0.25%胰蛋白酶，置于37°C培养箱中消化1-2分钟，观察细胞是否大部分脱落。
3. 轻轻吹打细胞，使之完全脱落后吸出，然后将悬液转移至离心管，1000RPM离心5分钟，弃去上清，重悬于1-2ml完全培养基中。
4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代，补充新的完全培养基至5-8ml/瓶，最后放入37°C、5% CO₂的细胞培养箱中培养。

悬浮细胞传代步骤

1. 采用半换液法，将培养瓶竖放静置1小时，轻吸掉3ml培养基，再补充3ml的完全培养基。
2. 经过数次培养后可进行离心换液，收集细胞悬液至离心管，1000RPM离心5分钟，弃去上清，补加1-2ml培养基后重悬。

细胞冻存

当细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，使用PBS清洗细胞，然后添加0.25%胰蛋白酶消化，待细胞回缩变圆后终止消化，转移至离心管中，再根据实际情况加入无血清冻存液以进行冻存。冻存细胞需直接放入-80°C冰箱24小时后再转入液氮罐中保存。

细胞复苏

从液氮中取出冻存管时，应佩戴防护面具，快速放入37°C水浴中解冻，待管内无结晶后，转移细胞至包含5ml完全培养基的离心管中，进行离心处理，然后接种入T25培养瓶继续培养。记得第二天更换为新鲜的完全培养基。

注意事项

在细胞运输过程中，可能会发生细胞脱落现象，这是正常的。如果发现细胞脱离较多，可进行离心处理，收集上清液进行过渡培养。采用南宫28品牌的培养基可以更好地保护细胞的生长过程，确保您的实验顺利进行。