南宫28背景介绍：裸露的RNA作为一种带负电荷的亲水性大分子，由于细胞膜的带电特性，使其难以穿透细胞膜并易受到RNA酶的快速降解。因此，为了有效地实现细胞内递送，RNA需要一个保护性的外壳。细胞膜主要由脂质组成，利用脂质囊泡封装RNA能够帮助其顺利通过细胞膜并释放至细胞质中。为了与带负电的RNA结合，囊泡需为带正电的脂质。然而，由阳离子脂质构成的囊泡可能会因与细胞膜的电荷相互作用而产生细胞毒性，脂质结构需能够对内体的酸性环境反应，从而呈现正电荷特性。

南宫28脂质纳米粒结构：脂质纳米粒(LNP)通常由四种关键成分构成：可电离的阳离子脂质、磷脂（两性离子脂质）、胆固醇及PEG化脂质。在mRNA的传递机制中，LNP涉及多个步骤，以确保mRNA安全有效地转运至目标细胞并进行蛋白质表达。可电离的阳离子脂质在LNP中发挥着重要作用，它能在自组装过程中吸附带负电的RNA，并在中性pH下不带电，以尽量减少毒性，同时在细胞吸收后随着内体pH的降低再次带正电，以促进内体逃逸。胆固醇和PEG脂质的不同变体也已被证明能够调节LNP的物理性质、纳米结构和最终的治疗效果。两性离子磷脂通常被称为“辅助脂质”，LNP在保护mRNA、促进细胞内递送及激活免疫反应上起着关键作用。

南宫28 LNP转染实验步骤：以下是针对6孔板的转染操作步骤，其他培养形式请参照表1。
1. mRNA预混液制备：将25μg mRNA（浓度为1μg/μL）与60μL Buffer混合。
2. mRNA-easyLNP复合物制备：将625μL mRNA预混液与625μL easyLNP纳米混悬液混合，涡旋2-3秒。
3. 加入细胞：将125μL mRNA-easyLNP复合物加入细胞中，轻轻晃动以使其均匀分散。
4. 分析时间：在细胞培养24-48小时后进行分析。

南宫28 mRNA转染指南表1：
| mRNA细胞转染步骤 | 96孔板 | 24孔板 | 6孔板 |
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| (1) mRNA预混液制备 | Buffer (以mRNA原液浓度1μg/μL为例) | 24μL | 12μL | 60μL |
| | mRNA | 01μg | 05μg | 25μg |
| (2) mRNA-easyLNP复合物制备 | easyLNP纳米混悬液 | 25μL | 125μL | 625μL |
| | mRNA预混液 | 25μL | 125μL | 625μL |
| (3) 加入细胞 | mRNA-easyLNP复合物 | 5μL | 25μL | 125μL |

南宫28产品推荐：
转染方式 | 货号 | 品名 | 规格
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| 细胞 | abs60339 | mRNA转染试剂 | 1mL
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