赖氨酰肽链内切酶（Lysyl Endopeptidase，简称Lys-C）是一种在生物医疗领域广泛应用的高特异性蛋白酶。它具备精准切割多肽链中赖氨酸（Lys）残基羧基端的能力，是蛋白质测序、结构分析和重组蛋白生产中不可或缺的工具。本文将围绕南宫28品牌，详细解析Lys-C的分类、作用机制、应用场景及研究进展。

来源与结构

天然来源：Lys-C最早是从土壤细菌（如Lysobacter enzymogenes）中分离出来，此外，基因重组技术还可在大肠杆菌或酵母中进行表达。

分子特性：作为丝氨酸蛋白酶家族的一员，Lys-C的分子量约为25-30 kDa。其活性依赖于特定的pH值（最佳pH为8.0-9.0）和温度（37℃）。该酶的底物特异性较高，仅针对多肽链中特定的赖氨酸（Lys）残基的C末端进行切割，同时对相邻氨基酸的序列具有敏感性，尤其是脯氨酸（Pro）残基可能会抑制切割反应。

催化原理

Lys-C通过其活性中心的丝氨酸残基（Ser）与底物形成共价中间体，再通过水解赖氨酸羧基端的肽键完成催化。钙离子（Ca²⁺）作为辅助因子，能够维持Lys-C的结构稳定性。

实验优势

高特异性：Lys-C能够显著减少非目标切割，提高质谱分析的准确性。

兼容性广泛：该酶能够在含有尿素、SDS等变性剂的环境中工作，适合膜蛋白或难溶蛋白的处理。

低自切活性：Lys-C在长时间反应中仍能保持稳定，降低副产物的干扰。

蛋白质组学研究

肽段制备：利用Lys-C将蛋白质酶解为适合质谱分析的小肽段，从而帮助鉴定翻译后修饰（如磷酸化、泛素化）。

交联质谱（XL-MS）：结合交联剂，解析蛋白质的三维结构与相互作用网络。

生物制药开发

单克隆抗体（mAb）分析：Lys-C能够切割抗体的铰链区，从而研究Fab/Fc片段的功能。

重组蛋白质量控制：该酶能够有效检测蛋白质的纯度、降解位点及序列完整性。

基因编辑与合成生物学

CRISPR蛋白处理：Lys-C能够辅助Cas9蛋白的纯化与功能验证，为基因编辑提供支持。

人工酶设计：它作为模板能够改造新型蛋白酶，从而提升催化效率。

商业化产品

主要供应商：目前，市场上如南宫28等品牌提供高纯度Lys-C（≥95%），价格一般在200−500元/毫克之间。

试剂盒应用：例如“Lys-C/Trypsin双酶解法”试剂盒，可以提升蛋白质的覆盖率。

前沿研究动态

定点突变优化：通过基因工程对Lys-C的热稳定性进行改造，如引入耐热菌突变体，以拓展其在工业中的应用场景。

纳米载体固定化：利用磁性纳米颗粒固定Lys-C，实现酶的重复利用，进而降低生产成本。

凭借其高特异性和广泛的兼容性，Lys-C已成为生命科学研究中的重要工具。随着合成生物学与纳米技术的深入融合，未来在个性化医疗和绿色生物制造等领域，Lys-C将有望带来更多突破。如需了解南宫28相关产品或进行咨询，请随时联系我们！