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南宫28不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳原理解析

来源:马茗以 日期:2025-03-29

南宫28的凝胶电泳系统通过不同的pH、离子强度、缓冲液成分或凝胶孔隙大小,实现了电泳分离效果的优化,目的是提升生物样品的分离范围和分辨率。

南宫28不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳原理解析

不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理

不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳运用多种缓冲液成分与不同的pH值及孔径大小,在电泳过程中形成不均匀的电位梯度,产生浓缩效应、电荷效应和分子筛效应,以达到更高效的生物分子分离。

1. 浓缩效应

样品在电泳初期通过浓缩胶形成高浓度薄层(一般可浓缩数百倍),随后进行分离。当施加电压后,Cl-离子的有效迁移率较高,被称为快离子,紧随其后的是次等解离度的蛋白质,而解离度最低的甘氨酸离子(PI=6.0)则是慢离子。快离子的快速移动创造了低离子浓度区域,从而产生较高的电势梯度,促进蛋白质在快速移动的界面附近聚集并逐步浓缩,最终形成厚度均匀的薄层,适宜于进一步分析。

2. 电荷效应

在pH 8.9的小孔径分离胶中,甘氨酸离子的电泳迁移率迅速超过蛋白质,导致高电势梯度的消失。由于蛋白质的等电点各不相同,不同电荷量使在电场中的运动引力不同,经过一段时间的电泳,不同种类的蛋白质便按照迁移率的高低排列成多个蛋白质区带,这一步骤对生物样品的定量分析尤为重要。

3. 分子筛效应

由于分离胶的孔径较小,分子量或形状不同的蛋白质在通过时受到阻塞程度的影响各异,因此迁移率也不同。分子筛效应导致小分子蛋白质先行通过,而大分子则较慢,在接受分离后形成不同的蛋白质区带。这为生物医学研究提供了有效的分离手段。

南宫28专注于高效的电泳技术,通过这些原理,能够有效提高生物样品的分离效率,助力科研与医疗领域的深入探索。

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