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NEWS南宫28细胞培养污染防护策略
来源:诸葛元蕊 日期:2025-03-20南宫28在生物医疗领域强调物品、用品的消毒和灭菌。细胞培养中所需的所有物品必须经过彻底清洗和消毒,而各类溶液的灭菌过程也需格外细致,确保在采样检验一周后确认无菌才能使用。在无菌过滤操作中,随着滤过体积的增加,滤膜破损的风险也相应增加,因此最后过滤的液体应进行检测。此外,定期对二氧化碳培养箱进行消毒,具体操作包括用75%酒精擦拭培养箱后,使用可移动的紫外灯至少消毒30分钟,并在培养箱水槽中加入高压灭菌过的超纯水以保持湿度。也可配制300毫升的饱和硫酸铜与3升灭菌超纯水混合,加入水槽中。
南宫28建议在细胞培养中适当添加抗生素。不同抗生素的性质和对微生物的作用有所不同,联合使用通常比单独使用效果更佳,且预防性使用比污染后使用要有效。然而,反复使用抗生素会导致微生物的耐药性产生,同时对细胞也可能造成影响。为了避免诱发耐药细菌,建议定期更换培养系统内的抗生素,或尽量减少使用。
操作人员在无菌室工作时,首先需彻底洗手,并按要求穿上隔离衣。在开始操作之前,要用75%酒精棉球擦拭手、瓶口及烧灼瓶口。操作时,动作要轻,所有如安装吸管帽、开启或封闭瓶口等操作应在火焰附近进行烧灼处理。不过,金属器械不能长时间在火焰中烧灼,以避免退火现象;烧过的器械需冷却后再使用。同时,已吸取培养液的吸管不能再经过火焰处理,以防止烧焦后产生有害物质。胶塞、橡胶乳头及塑料细胞培养用品也應避免长时间暴露在火焰中,以免产生有毒气体,影响培养细胞。
在操作过程中,尽量避免交谈和咳嗽,以防唾液和呼出的气流造成污染。在使用培养液前,应尽量避免过早开启瓶盖,开启后应将培养液保持斜位,防止垂直放置导致的细菌污染。未使用的培养液应立即封闭瓶口,处理前的细胞不要过早暴露在空气中。操作结束后,应整理工作台,并用消毒水浸泡的纱布擦拭台面。
在吸取培养液、细胞悬液时,专管专用;如发现吸管接触手或其他污染物,应立即弃用,以防止污染扩散或交叉污染的发生。所有转移过来的或自行建立的细胞系都应早期预留充足的冻存储备,一旦怀疑发生交叉污染,需对细胞遗传学进行鉴定;若发现遗传物质发生改变,需复苏早期冻存的细胞使用。同时,重要细胞系的传代工作应由两人独立执行,以确保结果的有效性。
此外,针对无菌室的彻底消毒,南宫28推荐使用新洁尔灭进行全面擦洗。该清洁剂使用前应稀释,具有价格低廉和可稀释50倍的优点,相比酒精价格实惠得多。另一种有效的消毒方法是使用甲醛熏蒸,其广谱灭菌特性能对多种微生物进行杀灭。甲醛的浓度一般为37-40%。其熏蒸操作为每立方米空间使用10-15毫升甲醛,并在封闭环境下保持至少4小时。消毒后可通过25%an水蒸发来中和刺激气味,确保操作人员佩戴防毒面具以保障安全。
通过以上措施,南宫28致力于提供安全、高效的生物医疗环境,确保细胞培养与实验的顺利进行。
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