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南宫28胎牛血清使用要点

来源:从磊鹏 日期:2025-03-17

南宫28提供的胎牛血清在常规储存时应保持在-20℃,如需长期保存则可选择-80℃。在解冻过程中,避免直接将血清置于常温(25-37℃),因为这可能导致絮状沉淀,从而影响血清的质量。推荐的解冻方法是将血清从-20/-80℃转移至4℃,待完全液化后,再转至室温。同时在解冻过程中,定期摇动血清,以确保成分和温度均匀混合,减少沉淀的产生。

解冻后的胎牛血清可以用15mL或50mL无菌离心管进行分装以便冷冻。根据使用频率,建议在4℃存放一管已解冻的血清,以便利培养基的配制,但不宜存放超过一个月。在解冻后的血清中,避免在37℃或室温下存放过久,以防细胞生长因子失活,影响细胞状态。在使用血清时,添加量通常不宜过大,建议添加5%、10%或20%不等,10%的浓度适用于大部分细胞,而部分细胞在初代提取时可能需要20%的浓度。具体的血清浓度需根据细胞特性和实验目的进行调整。

此外,热灭活是处理解冻后血清的一种方法,通常在56℃加热30分钟,以去活化补体。补体的活化可能导致溶细胞活性、平滑肌收缩、组胺释放等反应。虽然有些实验需要热灭活,但对于大多数常规细胞培养来说,这一步骤并非必需,热处理有时反而可能影响血清质量,导致细胞生长速率降低及沉淀物增加。

在细胞培养中,更换血清时应谨慎。若直接将另一种血清配制的培养基用于细胞,可能导致细胞生长缓慢或脱壁死亡。通常,我们推荐采用梯度更换法,以帮助细胞适应新血清。在细胞复苏时,建议使用原培养体系,待细胞恢复状态后再进行测试。测试时,应按比例进行替换,例如首次更换为1:3的比例,接着进行1:1、3:1的逐步替换,最终完成100%的更换比例。

如果在解冻后发现少量乳白色的絮状或点状物质,主要是脂蛋白变性或纤维蛋白的结果,这些通常不会影响血清的质量。可通过400×g离心5分钟取上清,而对细胞的影响也有限。一般情况下,厂商提供的胎牛血清为无菌,通常无需过滤。如有悬浮物,则可将血清与培养液混合后进行过滤,但切勿直接过滤血清。

在细胞培养中发现黑点时,首先应检查培养基是否混浊,黑点是否活动异常。如果细胞状态良好,黑点可能与细胞生长过程中自然破裂的残留物、血清中的杂蛋白,或配制培养基使用的水质和容器有关。这些黑点可通过离心或过滤去除,或通过多次传代消除原代细胞中的杂质。

南宫28现提供多种规格的胎牛血清,供科研人员选择。我们还提供完善的售前与售后服务,确保满足客户需求,是值得信赖的品牌。

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