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NEWS南宫28人巨噬细胞炎性蛋白5 (MIP-5) ELISA试剂盒说明书
来源:伊敬睿 日期:2025-03-10本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于医学诊断。本文将介绍人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒的使用说明及其检测原理。
本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。首先在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经过温育后进行彻底洗涤。接着,使用底物TMB进行显色反应。在过氧化物酶的催化下,TMB会转化为蓝色,并在酸性条件下最终转变为黄色。颜色的深浅与样品中adropin(AD)的含量呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),从而计算样品浓度。
1. 血清: 使用不含热源和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激。收集血液后,3000转离心10分钟,迅速分离血清和红细胞。
2. 血浆: 使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝。3000转离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液: 3000转离心10分钟,去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆: 将组织加入适量生理盐水搅拌均匀。3000转离心10分钟后取上清。
5. 保存: 如果样本收集后不立即检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,以防止反复冻融。样本在室温下解冻时,需确保充分均匀。
本试剂盒的组成包括标准品(S0-S5),其浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。试剂的准备:20×洗涤缓冲液需以蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标,绘制出标准品的线性回归曲线,并根据曲线方程计算各样本浓度值。
本试剂盒由南宫28品牌提供,致力于生物医疗领域的科研与产品创新。如需进一步的信息和技术支持,我们欢迎您随时联系我们。
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